2014 JOURNAL OF MEDICAL RESEARCHVol.1 No.1Vol.1Jul.–Dec. 2014ERA’S JOURNAL OF MEDICAL RESEARCHJul.–Dec. No.1ERA’S
ORIGINAL ARTICLE 


                  HYPolIPIDEMIC ACTIVITY oF CASSIA  

                ToRA SEEDS IN HYPERlIPIDEMIC RATS

        Vishnu Kumar1, Brijesh Rathore,1 Sharique Ahmad1 , Farzana Mahdi, 1, Ramesh Chander1,
Ashok Kumar Khanna 2, Jitendra Kumar Saxena 2 Abbas Ali Mahdi3 Pradyumn Singh4 and Raj Kumar Singh5

12
Department of Biochemistry & Pathology, Era’s Lucknow Medical College, Division of Biochemistry, Central Drug Research Institute and 
34
Department of Biochemistry, ( KGMC ), Lucknow– 226003, India, Department of Biochemistry, Shri Guru Ram Rai Institute of Medical & 
  Health Sciences, Patel Nagar, Dehradun 248001. 4Department of Pathology CMC, Vellore. 5Department of Biochemistry,  
            Shri Guru Ram Rai Institute of Medical & Health Sciences, Patel Nagar, Dehradun 248001.


ABSTRACT

The hypolipidemic activity of Cassia tora (Chakvat, Chakunda) (Family: Caesalpiniaceae) seeds 
extract has been studied in two hyperlipidemic models of rat. These are triton injected and Address for correspondence
                                                                            . Vishnu Kumar Awasthi
cholesterol rich HFD fed model of hyperlipidemia. In triton WR–1339 induced hyperlipidemia, DrAssistant Professor
feeding with root extract (500 mg/ kg body wt/ day p.o. ) exerted lipid lowering effect as Department of Biochemistry
assessed by reversal of plasma levels of total cholesterol (TC), phospholipids (PL), triglyceride Address:Era’s Lucknow Medical 
                                                                              ollege & Hospital
(TG) and reactivation of Post Heparin Lipolytic Activity (PHLA) of plasma. The other model CSarfarazganj, Hardoi Road, 
was fed with cholesterol rich HFD and seeds extract of Cassia tora (500 mg/ kg body wt/ day Lucknow–226003
p.o.) simultaneously for 30 days. This also caused lowering of lipid levels in plasma and liver Ph No : +91895358976
                                                                            ail: drvkawasthi@hotmail.com
homogenate and reactivation of plasma post heparin lipolytic activity, hepatic total lipoprotein E–m
lipase activity. The hypolipidemic activity of Cassia tora seeds was compared with a standard 
drug guggulipid (200 mg/ kg body wt/ day p.o.), a known lipid lowering drug in both models.

Key Words: Cassia tora seeds, Triton model of hyperlipidemia, Cholesterol rich HFD, 
Hypolipidemic agent, PHLA, Hepatic LPL activity, Hepatic steatosis.



INTRoD UCTIoN

Cassia tora (Chakvat, Chakunda) Cassia tora is a plant of The plant is claimed to be effective against a variety of ailments 
family Caesalpiniaceae. Chakvat grows throughout India in indigenous medicine such as in treatment of jaundice. 
especially on way sides and waste places, on hills of low In Chinese medicine, it is highly valued for the treatment 
elevations up to 1,800 m as well as in plains. Plant of Cassia of hyperlipidemia. Several polyherbal, formulations are 
tora is a herbaceous foetid annual weed, almost an under available in Chinese market for preventing the formation 
shrub, up to 90 cm in height; leaves pinnately compound, of atherosclerosis plaque (7). The aim of present work is to 
rachis grooved with a conical gland between each of the two further evaluate the hypolipidemic activity of cassia tora 
lowest pairs of leaflets, leaflets three pairs, obviate–oblong, which grows as a common weed in India.
membranous, base somewhat oblique, main nerves 8–10 
pairs; flowers yellow, sub sessile pairs, in the axils of the Cardiovascular diseases are leading cause of death in both 
leaves, the upper ones crowded, stamen serven, perfect and industrialized and developing nations. Disorders of lipid 
three staminodes; fruits subtetragenous obliquely septate metabolism following oxidative stress are the prime risk 
pods, 15–23 cm long, the sutures very broad, rhombohedral, factors for initiation and progression of these diseases 
23–30 per pod. The leaves and seeds of these plants are (8). The known lipid lowering drugs such as fibrates, 
used for medicinal purpose. The leaves and seeds are acrid, statins, bile acid sequestraints have many side effects in 
thermogenic, laxative depurative, antiperiodic, liver tonic, patients (9). Therefore, the research and development 
antihelmintic, cardiotonicEJMR and are useful in ringworm, of lipid lowering drugs from natural products are the 
pruritis, leprosy, skin disease, hepatopathy, helminthiasis, best option and also are in great demand. In view of the 
flatulence, dyspepsia, intermittent fevers, constipation, above considerations, the present study was designed to 
ophthalmopathy, cough, bronchitis, cardiac disorders, investigate hypolipidemic activity of Cassia tora seeds in 
haemorrhoids, antifungal, hypolipidemic, hepatoprotective, hyperlipidemic rats.
and hypotensive activities (1– 6).


67 2014 JOURNAL OF MEDICAL RESEARCHVol.1 No.1Vol.1Jul.–Dec. 2014ERA’S JOURNAL OF MEDICAL RESEARCHJul.–Dec. No.1ERA’S


MATERIAlS AND METHoDShyperlipidemia was produced by feeding with cholesterol rich 

Preparation of root extractHFD for 30 days. Drugs were administered orally at the same 
                                              doses as above simultaneously with cholesterol rich HFD in 
Cassia tora seeds were collected from local area of the drug treated groups. Control animals received the same 
Lucknow and identified taxonomically by Department of amount of vehicle. At the end of experiment, rats were fasted 
Pharmacology, Era’s Lucknow Medical College, Lucknow. overnight, anaesthetized with thiopentone solution (50mg/ 
A voucher specimen (CT–005/10) was also submitted. Seeds kg body wt/day i.p.), prepared in normal saline. Blood was 
were crushed and dried under shade. The powder (500g) withdrawn from retro–orbital plexus using glass capillary in 
was extracted with 95 % ethanol (10) in a soxhlet extractor EDTA coated tubes (3mg/ ml blood). There after animals 
for 72 h, the extract was concentrated to dryness under were sacrificed liver was excised immediately washed with 
reduced pressure and controlled temperature (50–60°C), cold 0.15 m KCl and kept it – 40 oC till analyses. Blood was 
yielding 23g of reddish brown solid (crude extract). This was centrifuged and plasma was taken (10).
stored in refrigerator and used to investigate hypolipidemic 
activity in rats. Guggulipid, a potent lipid lowering agent from Biochemical analysis of plasma and liver
Commephora mukul (Guggulipid) developed in Central Drug Plasma Post heparin lipolytic activity (PHLA) was assayed in 
Research Institute, Lucknow, was used as a standard drug.plasma spectrophotometrically using Intralipid as artificial 

Preparation of Cholesterol rich high fat dietsubstrate (11) plasma was diluted with normal saline in 
                                              a ratio of 1:3 and used for the analysis of total cholesterol 
Deoxycholic acid (5g) was mixed thoroughly with 700g of TC (12), phospholipids PL (13) and triglyceride TG (14) 
powdered rat Chow diet supplied by Ashirvad Industries, using standard enzymatic kits supplied by Merck India Ltd. 
Chandigarh, India. Ingredient and nutrient composition Mumbai India. Liver was homogenized (10%w/v) in cold 
of the normal rat diet was: casein 210; corn starch 440; 100mM phosphate buffer pH 7.2 and used for the assay of 
sucrose 100; maltose dextrin 100; cellulose 50; soya bean oil total Lipolytic; the lipoprotein lipase (LPL) activity (11). The 
50; vitamin mix 10 and minerals 35g/kg. Other Ingredients lipid extract of each homogenate prepared in a mixture of 
included choline bitrate (2g/kg) and t–butyl hydroquinone CHCl3: CH3OH (2:1, v/v) was used for estimation of TC (12), 
(0.008 g/kg). Proximate analysis of diet showed it contained PL (21) and TG (14). Plasma and tissue were also estimated 
crude protein 21; crude fat 5; crude fiber 4; and ash 8%. for protein content (15).
Simultaneously Cholesterol (5g) was dissolved in 300g warm 
coconut oil. This oil solution of Cholesterol was added slowly STATISTICAl ANAlYSIS
into powdered mixture to obtain homogeneous soft cake. One way analysis of variance (ANOVA–New man’s 
This Cholesterol rich (HFD) was molded in shape of pellet of student t– test) was performed by comparison of values for 
about 3g each (10).hyperlipidemic groups with control, hyperlipidemic and 

Animalsdrug treated groups with hyperlipidemic All hypothesis 
                                              testing were two–tailed. P<0.05 was considered statistically 
In vivo experiments were conducted as per guidelines significant and results were expressed as mean ± SD of six 
provided by Animal Ethics Committee of Central Drug rats. The graph pad INSTAT 3.0 software carried out the 
Research Institute, Lucknow, India. Male adult rats of Charles statistically analysis. (16).
foster strain (200–225g) bred in animal house of the Institute 
were used. The animals were housed in polypropioline cages RESUlT S
and kept in uniform hygienic conditions, temperature 25–26 Effect of Cassia tora seeds extract in triton induced 
°C, relative humidity 50–70% and 12/12 h light/dark cycle hyperlipidemia
(light from 8:00 a.m.to 8:00 p.m.) and provided with standard 
rat pellet diet and water ad libitum (10).The data in Table 1 shows that in acute administration of 
                                              triton WR–1339 in rats caused marked increase in their 
Triton and Cholesterol rich HFD induced hyperlipidemiaplasma levels of TC (2.86 fold), PL (2.76 fold) and TG (2.68 

The rats were divided into four groups: control, hyperlipidemic, fold) following inhibition of PHLA by 26%.Treatment with 
hyperlipidemic treated with Cassia tora seeds or guggulipid Cassia tora seeds extract exerted a decrease in these levels 
(standard drug). Containing six animals in each group. In of TC (25%), PL (26%), TG (28.0 %) simultaneously with 
the acute experiment to induce hyperlipidemia, triton WR–reactivation of PHLA by (22%). The hyperlipidemic action 
1339 (Sigma Chemical Company, St.Louis, MO, USA) was of guggulipid (31–35 %) was comparatively higher to that of 
administered (400 mg/ kg body wt/ day p.o.) by intraperitonial Cassia tora seeds extract.EJMR
injection. Cassia tora seeds extract and guggulipid were Effect of Cassia tora seeds extract in cholesterol rich HFD 
macerated with aqueous gum accacia (0.2 % w/v) suspension induced hyperlipidemia
and fed orally at the doses of 500 and 200 mg/ kg body wt/ 
day p.o.), respectively, simultaneously with triton and blood In this model of hyperlipidemia (table–2), feeding with 
was collected after 18 hrs (10). In the chronic experiment, cholesterol rich HFD in rats caused marked increase in their 


                                            89 2014 JOURNAL OF MEDICAL RESEARCHVol.1 No.1Vol.1Jul.–Dec. 2014ERA’S JOURNAL OF MEDICAL RESEARCHJul.–Dec. No.1ERA’S


plasma levels of TC (2.34 fold), PL (1.71 fold) and TG (2.18 is compared with control, cholesterol rich HFD and drug 
fold) following inhibition of PHLA by (32%). Treatment with treated groups with cholesterol rich HFD. *P<0.05; **P<0.01; 
Cassia tora seeds extract for 30 days, reversed these plasma ***P<0.001.
levels of TC (25%), Pl (21%) and TG (31%) simultaneously 
with reactivation of PHLA by (21.0%). Feeding with Table 3: Effect of Cassia tora (seeds) extract and guggulipid 
cholesterol rich HFD in rats also caused marked accumulation on liver lipid in Cholesterol Rich HFD induced 
of TC (1.53 fold), PL (1.72 fold) and TG (1.57 fold) following hyperlipidemia.
diminution of LPL activity (37%) in their liver (Table–3).  Experimental Tot a l  Phospholipid Triglyceride lPl activity(µ mol 
However, treatment with Cassia tora seeds extract decrease Schedulecholesterol (mg/dl)(mg/dl)Free Fatty Acid 
in these levels of TC.(mg/dl)released/h/mg 
                                                                                      protein)

Effect of Cassia tora seeds extract in cholesterol rich HFD Control6.75±0.30 22.43±2.71 5.44±0.60 79.85±4.82
diet induced steosis in liveCholesterol 10.33***±0.6238.58***±5.338.56***±1.0250.26***±2.72

(26%), PL (22%) and TG (29%) was observed following rich HFD (1.553 fold)(1.72 fold)(1.57 fold)(–37%)
reactivation of LPL activity (26%) in hyperlipidemic animals. treated
Guggulipid was more effective hypolipidemic to that of Cholesterol 7.67***±0.622940***±3.605.22***±0.7463.09*±3.75
Cassia tora seeds.richCassia HFD+ tora  (–25.75%)(–22.29%)(–28.62%)(+25.52%)

Table 1: Effect of Cassia tora (seeds) extract and guggulipid (seeds) 
on plasma lipids in triton induced hyperlipidemiaextract
                                                Cholesterol 7.36***±0.9028.47***±5.045.11***±0.6264.99**±4.66
ExperimentalTotal cholesterolPhospholipidTriglyceridePHlA  rich HFD (–28.75%)(–26.20%)(–31.19%)(–29.30%)
Schedule(mg/dl)(mg/dl)(mg/dl)(n mol Free +Guggulipid
                                    Fatty Acid 
                                    released Values are mean ± SD of 6 animals Values in the parenthesis 
                                      /h/l)indicate percent change, cholesterol rich HFD treated groups 
  Control82.46±3.33 90.66±8.69 87.52±6.11 16.86±0.95were compared with control cholesterol rich HFD and drug 
Triton 235.89***±12.09 250.57***±24.86 234.60***±12.09 11.56**±1.34treated groups with cholesterol rich HFD. *P<0.05; **P<0.01; 
treated(+2.86 fold) (2.76 fold)  (2.68 fold) (–25.50 %)
                                                ***P<0.001.
Triton + 177.89***±8.69 185.88**±12.80 169.87***±6.14 14.11*±0.70
Cassia tora (–24.58%) (–25.81%) (–27.59%) (+22.56%)DISCUSSIoN
(seeds) 
extractTriton WR–1339 acts as a surfactant and suppresses the 
Triton + 159.14***±7.85 149.14***±8.23 153.13***±8.65 14.36*±0.68action of lipases to block the uptake of lipoproteins from 
  Guggulipid(–32.53%) (–32.49%) (–32.72%) (+24.22%)circulation by extra hepatic tissues, resulting into increased 

Values are mean ± SD of 6 animals. Values in parenthesis blood lipid concentration (10, 17). The lipid lowering 
indicate percent change. Triton treated group is compared effect of Cassia tora seeds extract may be due to an early 
with control, triton and drug treated with triton *P<0.05; clearance of lipids from circulation in Triton model and it 
**P<0.01; ***P<0.001.may be due to reactivation of lipolytic enzymes as evidenced 
                                              by increased PHLA. Investigations with cholesterol rich 
Table 2: Effect of Cassia tora (seeds) extract and guggulipid HFD fed hyperlipidemic animals showed that seed extract 
on plasma lipids in Cholesterol Rich HFD induced stimulates PHLA and hepatic LPL activity, both of which 
hyperlipidemia.play a key role in lipid catabolism and their utilization in 

ExperimentalTotal cholesterolPhospholipidTriglyceridePHlA ( n mol the body (18), leading to decrease in the level of plasma 
  Schedule(mg/dl)(mg/dl)(mg/dl)Free Fatty Acid and liver lipids in above models. It is reported that 
                                  released /h/l )hypolipidemic action of guggulsterone, the active principle 
  Control88.59±6.98 80.62±4.29 114.80±11.30 19.31±1.30of guggulipid, is mediated through activation of PHLA, LPL 
Cholesterol 208.18***±22.10138.27***±24.86251.35***±24.5913.11***±1.18and LCAT, inhibition of hepatic cholesterol biosyntheses 
rich HFD (2.34 fold)(1.71 fold)(2.18 fold)(–32%)and increased faecal bile acid excretion (19, 20, and 21). The 
treatedsame mechanism may also interplay in the hypolipidemic 
Cholesterol 155.36**±11.13108.86***±6.78172.88**±6.4915.88*±1.78
rich HFD + (–25.37%)( –21.26%)(–31.21%)(+21.12%)effect of Cassia tora seeds extract.
Cassia tora Here we have tested crude extract of Cassia tora seeds which 
(seeds) extractEJMR
                                                however, upon research and development, may produce a more 
Cholesterol 153.39***±8.83100.30***±8.77169.92***±6.0916.33 *±1.64
rich HFD+ (–26.31%)(–27.46%)(–32.72%)(–24.56%)potent lipid lowering natural product or a pure compound 
Guggulipidlike guggulipid/ guggulsterone from commephora mukul 

Values are mean ± SD 0f 6 animals. Values in the parentheses (22).biological Further activity work in vivo on drug and metabolism in vitro Cassia and assessment tora seeds and the  
indicate percent change. Cholesterol rich HFD treated group 
                                              its fraction is in progress to substantiate the present findings.


89 2014 JOURNAL OF MEDICAL RESEARCHVol.1 No.1Vol.1Jul.–Dec. 2014ERA’S JOURNAL OF MEDICAL RESEARCHJul.–Dec. No.1ERA’S


REFERENCE13. Zilversmith DB, Davis DK. Micro determination of plasma 

1. W arrier P.K. Indian medicinal plants.A compendium of 500 phospholipidsMed 1950; 35: 155–160. by trichloroacetic acid precipitation. J Lab Clin 
species 2001; 2: 26.

2. Acharya T.K., Chatterjee I.B. Isolation of Chrysophanic acid 14. Buccolotriglyceride G, David by the H.  useQuantitative of enzymes. Clin determination Chem 1973; . 19: 476– of serum 
– 9 –anthrone, the major antifungal principal of Cassia tora. 480.
Lloydia 1975; 38: 218–220.

3. Vettrivel Rajan A, Shanmugavalli N, Greety Sunitha C and 15. Lowrymeasurement OH, Rosebrough with folin phenol NJ, Farr reagent. AL, Randall J. Biol Chem RJ.  Protein1951;  
Umashankar V. Hepatoprotective effects of Cassia tora on 183: 265–272.
CCl4 induced liver damage in albino rats. Ind. J Sci & Tech 
2009; 2: 41–44.16. Woodson RF. Statistical Methods for the analysis of 

4. Umesh KP, Saraf S and Dixit VK Hypolipidemic activity of Biochemical Data Chichester: Wiley 1957; 315.
seeds of Cassia tora. Linn J Ethan Phar 2004; 90: 249–252.17. Kumar V, Khan MM, Khanna AK, Singh R, Singh S, Chander 

5. Wong S.M., Wong M.M., Seligmann O., Wagner H. R,activity Mahdi of F,  MahdiAnthocephalus AA, Saxena indicus JK and root Singh in hyperlipidemic RK Lipid lowering rats  
Newantihepatotoxic napthopyrone glycosides from seeds of Evid Based Complement. Altern Med 2010; 7 : 317–3.
cassia toraPlanta, Medica 1989; 55: 276–280.

6. Chan S.H., Koo A., K.M.L. The involvement of medullary 18. Browndihydrocadambine RT, Chapple and CL.  3β– isodihydrocadambine.Anthocephalus alkaoids Tetrahydran : 3α–  
reticular formation in the hypotensive effect of extract from Letters 1976; 31: 2723–2724.
seeds of cassia tora. Am. J. Chines. Med1976; 4: 383–389.

7. Kee C.H. The pharmacology of Chinese Herbs. CRC Press. Boca 19. NNCultivation Sircar Pharmacological and Utilization of basis Medicinal of Ayurvedic Plants. (Atal, therapy. CK, BM  In: 
Raton 2001; 103.Kapoor, Eds.) Publication and information Directorate, CSIR, 

8. Singh PP, Mahdi F, Roy A and Sharma P. Reactive oxygen New Delhi, India 1992: 507–518.
species, reactive nitrogen species and antioxidants in 20. Khanna AK, Chander R, Kapoor NK, Dhawan BN. 
etiopathogenesis of diabetes mellitus type–2. Ind J Clin Hypolipidemic activity of picroliv in albino rats. Phytother Res 
Biochem 2009; 24: 324–342.1994; 8: 403–407.

9. Chattopadhyaya R, Pathak D, Jindal DP Antihyperlipidemic 21. Chander R, Khanna AK, Kapoor NK. Lipid lowering activity 
agents. A review. Indian drugs 1996; 33: 85–97.of guggulsterone from Commephora mukul in hyperlipidemic 

10. Kumar V, Singh S, Khanna AK, Khan MM , Chander R, Mahdi rats. Phytotherapy Res 1996; 10: 508–511.
F, Saxena JK, Singh R and Singh RK Hypolipidemic activity 22. Chopra RN, Nair SL, Chopra IC. Anthocephalus indicus in 
of Anthocephalus indicus (KADAM) in hyperlipidemic rats. glossary of Indian Medicinal plants. Chopra RN, Nair SL, 
Medicinal Chemistry Research 2008; 17: 152–158.Chopra IC (Publication and information Directorate Ed;) 

11. Wing DR, Robinson DS. Clearing factor lipase in adipose CSIR, New Delhi, India, 1956: 20.
tissue .Biochem . J. 1968 ; 29: 1798–1803.

12. Deeg R,Ziegenborn J. Kinetic enzymatic method for automated 
determination of cholesterol in serum. Clin Chem 1983; 29: 
1798–1803.











            EJMR







                                            1011